【样品】小鼠指甲

●取样方法

【方法】

【基因名・目的片段】
・Mouse TATA box binding protein (TBP) 0.5 kb
・Mouse transferrin receptor (Tfr) 1.5 kb
・Mouse membrane glycoprotein (Thy-1) 2.6 kb

【引物序列】
Mouse TBP F ： CAGTTGCTACTGCCTGCTGTTGTT
Mouse TBP R ： GCTAGGATTAAAGACGTGCCACCA
Mouse Tfrc F ： TGTGGAGGGTCAACGTGGTAGTT
Mouse Tfrc R ： GTGACATTCTCAGGTGGCAGCTT
Mouse Thy-1 F02： CCACAGAATCCAAGTCGGAACTCTTG
Mouse Thy-1 R05： GTAGCAGTGGTGGTATTATACATGGTG

【反应条件】
DW                                  　              11
2×Buffer  for KOD FX Neo         　25
2mM dNTPs                                    10
10 pmol/ml  Primer F                     1.5
10 pmol/ml  Primer R                    1.5
KOD FX                                              1 
　　　　　　　　　　                   50 μL

【PCR循环】
KOD FX・KOD FX Neo：
94℃, 2 min.
(98℃, 10 sec., 68℃, 1min./kb) ×35 cycles

※其他公司试剂按其说明书推荐的最识条件进行反应。

【评语】
 小鼠指甲(toe)可通过不伤害小鼠的方式简便地获取，是进行基因分型的最适合的材料之一。用KOD FX系列可对小鼠指甲进行高效率的PCR，请务必尝试一下。