THUNDERBIRD® Next qPCR Mix 系列<实验例1>扩增效率的提高
将每个目的片段的PCR效率的误差限制到最低，可定量长至500bp的片段。
【100bp~500bp的扩增确认】
以人工合成的基因为模板，Forward 引物为共用引物，设计扩增长物为100bp、200bp、300bp、400bp及500bp的Reverse引物。使用这些引物，分别用THUNDERBIRD Next SYBR qPCR Mix及各公司Realtime PCR试剂进行107~101拷贝的扩增，比较各扩增长度的PCR效率。
结果显示，用其他公司的产品时扩增效率低下或不能检测的400bp以上的目的片段，使用本产品检测时也未见扩增效率低下。
*Realtime PCR按各公司推荐条件进行反应。
|
所谓扩增效率（PCR效率）是指？ 使用系列稀释样品作成标准曲线，可根据该标准曲线的斜率（Slope）计算出扩增效率。 例如，标准曲线（Slope）的值为-3.322时，按以下方法进行计算。 E=10(-1/-3.322) – 1 = 1.999-1 =0.999(99.9%) 该值越接近1（100%），PCR效率越高，越接近于每增加1个循环DNA量增加2倍的理想状态。 |
循环数（Ct值） DNA浓度（Log） |
