用途
●在cDNA合成及in vitro 翻译等使用RNA的实验中使RNA保持稳定
●在RNA探针的制备及in vitro 翻译等产生RNA的实验中使RNA保持稳定
说明
本酶是从人胎盘中分离出来的分子量为51kDa的蛋白，与RNaseA以1:1的比例形成复合体，表现出可逆的非拮抗抑制作用。
通过在RT-PCR中RTase反应时添加本产品，可得到稳定的结果。
特征
●可在较广的pH范围内保持活性
DTT存在下可在pH5～8的范围内使用。
实验例
1.RT-PCR时RNase Inhibitor的效果
使用MagExtractorTM -RNA-(CodeNo. NPK-201F)从HL60细胞中提取RNA，以该RNA为模板，比较了有无RNase A添加时RT-PCR的结果。在各种条件下使用Random Primer进行cDNA的合成后，使用Human IL-8 的RT-PCR引物对进行PCR。结果表明，即使样品中有RNase存在时，也确认到有扩增。
参考文献
1)J. Sambrook, et al., Molecular Cloning A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory (1982)
2)G. Scheele and P. Blackburn, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76:4898-4902(1979)
3)P. Blackburn, et al., J. Biol. Chem., 252: 5904-5910(1977)
4)P. Blackburn and B. Jailkhani, J. Biol. Chem., 254: 12488-12493(1979)
- 产品内容
RNase inhibitor(20～40U/μl)
组分:
20mM Hepes-KOH(pH7.6)
50mM KCl
8mM DTT
50% Glycerol
活性的定义:使5ng的RNaseA的活性抑制50%所需的酶量为1U。
比活性:
100U/μg protein
来源:
E. coli重组体
- 注意事项
*虽然Inhibitor的溶液中含有消防法危险物
第4类 着火性液体 第3石油类 水溶性
液体50%的甘油，但是在着火点测试试验中已确认不属于危险物品。
- 备注
本产品一般在其他酶的反应buffer中进行使用，但反应液中的DTT浓度至少要有1mM。另外，已确认反应液的pH值在5.0～8.0的范围内效果较高。
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