KOD FX实验例15: 使用转基因鼠鼠尾扩增进行基因分型例
【样品】
转基因小鼠尾巴Lysate
「Mouse tail前处理方法」
【反应条件与循环】
【PCR条件】
模板: 50μl反应体系中使用按上述方法配制的Mouse tail Lysate 2μl。
<反应条件>
终浓度
PCR grade water 9 μl
2x PCR buffer 25 μl 1×
2mM dNTPs 10 μl 0.4mM each
10pmol /μl Primer #1 1.5 μl 0.3μM
10pmol /μl Primer #2 1.5 μl 0.3μM
Mouse Tail Lysate 2 μl
KOD FX (1.0U/μl) 1 μl 1.0 U / 50μl
----------------------------------------------------------------------------------------
Total reaction volume 50 μl
<循环>
95℃ 2min
↓
(95℃ 30sec, 60℃ 30sec, 72℃ 1min)×40cycles
↓
72℃ 3min
↓
4℃ ∞
【結果】
【评语】
适合于粗样品的KOD FX与碱裂解法组合使用,可简便地对转基因小鼠进行基因分型。
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