KOD FX 实验例23~24
以下为来自各位老师的KOD FX使用例,希望能对大家的实验有所帮助。
实验例7: 人类CYP11A1基因启动子区域的扩增 |
【基因名】人CYP11A1基因5'上游区域
【样品】人间叶系干细胞株UE7T-13基因组 1ng
【目的片段长】2350bp
【引物】27mer、0.25μm
【循环】
KOD FX: 94℃ 2min
(98℃ 10sec, 68℃ 2min30sec)x 35cycle
其他公司酶:推荐条件
【数据提供】
福井大学医学部分子生物信息学
矢泽 隆志 老师
【来自老师的评语】
用其他公司产品,无法看到特异性扩增,而用KOD FX则只有特异性条带。
实验例8: 人类SF-1cDNA(GC-rich)的扩增
【基因名】人SF-1
【样品】人精巢cDNA 1ng
【目的片段长】约1.4kbp
【引物】23mer、0.25μm
【循环】
KOD FX: 94℃ 2min
(98℃ 10sec, 68℃ 1min30sec)x 30cycle
其他公司酶:推荐条件
【数据提供】
福井大学医学部分子生物信息学
矢泽 隆志 老师、稻冈 齐彦 老师
【来自老师的评语】
由于以制作发现载体为目的,因此不想用会引起很多错误的DMSO。
由于是GC-rich的目的片段,用其他公司产品无法扩增,而用KOD FX可得到大量的扩增,且测序结果也是正确的。