KOD FX实验例36: 使用KOD FX对小鼠滤纸血的PCR分析
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实验例20：用KOD FX对小鼠滤纸血进行PCR分析 |
【样品】
小鼠血液
【前处理】
【目的片段】
CIITA 450 bp
【引物】
均为21mer
【反应液组成】
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dH2O |
11 <μl> |
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2x PCR Buffer for KOD FX |
25 |
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2mM dNTPs |
10 （0.4mM） |
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10 pmol/μl Primer F |
1.5 |
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10 pmol/μl Primer R |
1.5 |
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KOD FX (1U/μl) |
1 |
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Total |
50 μl |
【PCR 循环】
94˚C (2 min)
↓
98℃ (10 sec.), 60˚C (30 sec.), 72˚C (40 sec.) × 30 cycles
↓
72℃ (7 min.)
【数据提供】
名古屋市立大学医学研究科细胞分子生物
金泽智 老师
【来自老师的评语】
使用KOD FX即便在很短的时间内也能高效率地检测出转基因。此外，positive control（lane4,9）及negative control（lane5,10）的检测灵敏度都很好，没有出现false posi。以后，在管理转基因小鼠检测转基因时仍然会用KOD FX。
