用途
RT-PCR
说明
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使用高效率逆转录酶ReverTra Ace® 及高保真性PCR酶KOD -Plus-的高保真・高效率RT-PCR试剂盒。KOD -Plus- 的保真性是Taq DNA polymerase扩增时的约80倍，最适用于克隆。 |
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特征
●使用高效率逆转录酶:ReverTra Ace®
使用通过基因工程改造的突变型M-MLV RTase 「ReverTra Ace®」，可合成14kb以上的cDNA。
●使用高保真性PCR酶:KOD -Plus-
使用高保真性PCR酶「KOD -Plus-」。本试剂盒在RT-PCR过程中，发生突变克隆的概率非常低：1kb目的片段约为3%，故适用于克隆。
●可对各种长度的目的片段进行扩增
通过对PCR缓冲液进行优化，对难扩增的目的片段也可以实现有效的扩增。
实验例
1. RT-PCR扩增性能的比较(目的片段长度的比较)
以HeLa细胞来源的total RNA为模板，使用各公司高保真性RT-PCR试剂盒进行扩增性能的比较。
结果显示，与其他公司的试剂盒相比，本试剂盒得到了更好的结果。
2. RT-PCR扩增性能的比较(灵敏度的比较)
将已知量的E.coli来源的ClpB RNA与HeLa细胞来源的total RNA(1μg)混合，使用各公司高保真性RT-PCR试剂盒进行检测，进行了灵敏度的比较。
结果显示，ReverTra -Plus-TM 的检测灵敏度比其他公司的高保真性RT-PCR试剂盒高出10倍以上。
参考文献
1) M. Takagi, et al., Appl. Environ. Microbiol., 63: 4504-4510(1997)
2) H. Hashimoto, et al., J. Biochem.(Tokyo), 125: 983-986(1999)
3) H. Mizuguchi, et al., J. Biochem.(Tokyo), 126: 762-768(1999)
4) H. Hashimoto, et al., J. Mol. Biol., 306: 469-477(2001)
- 产品内容
ReverTra® Ace 100μl
KOD -Plus- 100μl
RNase Inhibitor 100μl
5×RT Buffer(含有25mM MgCl2)[TRT-1B] 400μl
10×PCR Buffer for ReverTra -Plus-TM* [KOD-3B] 500μl
25mM MgSO4[KOD-2S] 500μl
10mM dNTPs[NTP-301] 300μl
RNase Free H2O 1200μl
Oligo(dT)20[FSK-201] 500μl
Random Primer[FSK-301] 100μl
G3PDH Control Primer Set** 50μl each
Positive Control RNA 50μl
*10×PCR Buffer for ReverTra -Plus-TM 与KOD -Plus- Ver.2使用的Buffer组分相同。
**可适用于人、小鼠、大鼠及猪。G3PDH的假基因比较多，用于样品时，推荐用DNaseⅠ对样品进行处理。
相关产品
(另外销售的包装)
| 品名 | Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书下载 |
|---|---|---|---|---|---|
| ReverTra Ace用 Buffer (5× RT Buffer) | TRT-1B | 1ml×1支 | RMB 50 | -20℃ | - |
| KOD -Plus- Ver.2用 Buffer (10×) | KOD-3B | 1ml×1支 | RMB 100 | -20℃ | - |
| KOD-Plus-用25mM Mg2SO4 | KOD-2S | 1ml×1支 | RMB 50 | -20℃ | - |
| dNTPs Mixture(10mM) | NTP-301 | 各2umoles/0.2ml × 1支 | RMB 200 | -20℃ | - |
| oligo(dT)20 | FSK-201 | 1nmole × 1支 | RMB 200 | -20℃ | - |
| Random Primer(9mer) | FSK-301 | 2.5nmoles × 1支 | RMB 200 | -20℃ | - |
●KOD系列用高效率TA克隆试剂盒
| 品名 | Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书下载 |
|---|---|---|---|---|---|
| TArget Clone™-Plus- | TAK-201 | 10次份 × 1支 | RMB 380 | -20℃ |
|
●高效率cDNA合成试剂盒
| 品名 | Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书下载 |
|---|---|---|---|---|---|
| ReverTra Ace -α- | FSK-101 | 100次份 × 1 | RMB 1,950 | -20℃ |
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●高效率逆转录酶
| 品名 | Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书下载 |
|---|---|---|---|---|---|
| ReverTra Ace | TRT-101 | 10000U × 1支 | RMB 800 | -20℃ | - |
●高保真性PCR酶
| 品名 | Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书下载 |
|---|---|---|---|---|---|
| KOD -Plus- | KOD-201 | 200U × 1支 | RMB 800 | -20℃ |
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●RNase Inhibitor
| 品名 | Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书下载 |
|---|---|---|---|---|---|
| RNase Inhibitor Recombinant type | SIN-201 | 2500U × 1支 | RMB 300 | -20℃ | - |
